Осветительное устройство: состоит из зеркала, ирис-диафрагмы и конденсора. Зеркало служит для

Темнопольная микроскопия

Осветительное устройство: состоит из зеркала, ирис-диафрагмы и конденсора. Зеркало служит для

Руководство

к лабораторным занятиям по микробиологии

для студентов фармацевтических вузов и

фармацевтических факультетов

Под редакцией доктора медицинских наук, профессора, академика АНТК Украины И.Л.Дикого

Харьков – 2000

РАЗДЕЛ «МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ»

Тема: Виды микроскопии: назначение и принципы применения

Цель: Ознакомиться с принципами и методами изучения морфологии микроорганизмов.

Микроорганизмы можно увидеть при помощи оптического при­бора – микроскопа. Микроскоп (от греч. micros – малый и scopeo – смотрю) служит для изучения малых объектов, невиди­мых невооруженным глазом.

В микробиологии микроскоп используется для исследования как живых, так и убитых микробов, в окрашенном или неокрашенном виде.

В микробиологической практике, в зависимости от целей объективов исследования, применяют различные виды микроскопий: светопольную, фазово-контрастную, аноптральную, люминисцентную, электронную.

Вопросы для самоподготовки

1. Виды микроскопии: светопольная, темнопольная, фазово-контрастная, аноптральная, люминес­центная, электронная.

2. Устройство светопольного микроскопа и правила работы с ним. Иммерсионная система увеличения.

Литература

1. Дикий И.Л., Холупяк И.Ю., Шевелева Н.Е., Стегний М.Ю. Микробио­ло­гия. – Х.: Прапор, Издательство УкрФА, 1999. – С. 18-50.

2. Н.П.Елинов, Н.А.Заикина, И.П.Соколова. Руково­дство к лабораторным занятиям по микробиологии. – М.: Медицина, 1988. – С. 9-35.

Светопольная микроскопия.

Устройство светопольного микроскопа ипорядок работы с ним

Обычная светопольная (или световая) микроскопия предназначена для изучения окрашенных микроскопических препаратов, которые интенсивно поглощают свет.

На рис. 1 изображен светопольный биологический микроскоп. Его механическая часть состоит из основания (или штатива), коробки с микромеханизмом, предметного столика, тубусо­держателя, бинокуляра, револьвера с объективами.

В штативе различают нижнюю часть (или ножку), и верхнюю часть (или колонку).

К колонке, которая служит ручкой для переноса микроскопа, прикреплен подвижный предметный столик, на кото­рый помещается исследуемый объект.

Он имеет центрировку и при помощи винтов передвигает препарат в двух взаимно перпендикулярных направлениях. Отсчет перемещения в обоих направлениях может производиться по шкалам и нониусу с точностью до 0,1 мм.

К верхней части колонки присоединяется труба микроскопа – тубус. Тубус является подвижной трубкой, к которой прикрепляются линзы, служащие для увеличения исследуемого объекта. Тубус приводится в движение вверх и вниз двумя системами винтов: макровинтом и микровинтом для тонкой фокусировки.

Для грубой наводки служит зубчатка, или кремальера, при­водимая в движение макрометрическим винтом. Этим винтом пользуются при малых увеличениях, а также при больших увеличениях для грубой первоначальной установки. Перемещение ту­буса рукояткой макровинта возможно в пределах 50 мм.

Для более точной установки служит микрометрический винт. На правой рукоятке тонкой фокусировки закреплен барабан со шкалой, разделенной на 50 частей. Цена одного деления шкалы барабана 0,002 мм.

Один оборот барабана соответствует перемещению тубуса на 0,1 мм. Общая величина перемещения ту­буса от упора до упора равна 2,2-2,4 мм.

Микрометрический винт является одной из наиболее хрупких частей микроскопа, и обращение с ним требует особой осторожности.

Передвигая ту­бус при помощи этих двух винтов, его устанавливают так, чтобы получить наиболее ясную микроскопическую картину; это достигается, когда расстояние от рассматриваемого объекта до объектива равно фокусному расстоянию этого объектива.

Верхняя часть тубусодержателя заканчивается головкой, служащей для крепления револьвера и тубуса. В верхней части тубуса расположен окуляр, а к нижней части его прикреплен револьвер, в гнезда которого ввинчива­ются объективы. Револьвер вращается вокруг своей оси, что позволяет поставить тот или другой объектив при желании по­лучить большее или меньшее увеличение.

Оптическая часть микроскопа состоит из объективов, оку­ляра и осветительного устройства.

Осветительное устройство находится под предметным столиком и состоит из зеркала и конденсора с диафрагмой. Зеркало служит для отражения световых лучей по направлению к объек­тиву и через него внутрь микроскопа. Одна сторона зеркала плоская, другая вогнутая. Плоским зеркалом пользуются при дневном рассеянном свете, а вогнутым – при искусственном ос­вещении.

Конденсор представляет собой двояковыпуклую линзу, прикрепляемую снизу предметного столика с таким расчетом, чтобы линза конденсора располагалась под отверстием предмет­ного столика. Конденсор служит для собирания (конденсации) пучка световых лучей, что обеспечивает наибольшее освещение исследуемого предмета.

При микроскопировании с дневным светом конденсор необ­ходимо поднять до уровня предметного столика; при искусст­венном освещении конденсор опускают до тех пор, пока при ма­лом увеличении изображение источника света не появится в плоскости препарата. При микроскопии неокрашенных препаратов конденсор следует также опустить.

Между зеркалом и конденсором помещается диафрагма, кото­рая регулирует объем лучей, падающих на объектив. Она состоит из стальных лепестков и при помощи рычага может менять свой диаметр. Окрашен­ные препараты следует рассматривать при открытой диафрагме; при изучении неокрашенных препаратов необходимо открыть отверстие диафрагмы.

Объективы представляют собой систему двояковыпуклых линз, заключенных в металлическую оп­раву. Передняя (фронтальная) линза объектива является главнейшей, производящей увеличение. Лежащие за ней линзы корригируют изображе­ние и поэтому называются коррекционными.

Степень увеличения исследуемого объекта зависит от кри­визны линзы используемого объектива. Чем меньше кривизна линзы, тем меньше увеличение и, наоборот, чем больше кривизна линзы, тем больше увеличение.

Обычно объек­тивы микроскопа имеют цифровое обозначение длины фокусного расстояния, которое зависит от кривизны линзы: чем более выпукла поверхность линзы, тем меньше фокусное расстояние и тем больше получаемое увеличе­ние.

Характеристика объектива состоит из его собственного увеличения, фокусного расстояния, численной апертуры. Чем меньше фокусное расстояние, тем сильнее объектив, больше его собственное увеличение. На корпусе объектива выгравированы обозначения собственного увеличения (´8, ´20, ´40, ´90) и численная апертура.

Численная апертура – произведение пока­зателя преломления среды на синус половины отверстого угла – для объектива характеризует угол, под которым еще может вхо­дить в объектив наклонный луч.

Кроме этих обозначений, на корпусе объективов апохроматов пишется «апохр» и на иммерси­онных «ОИ» или «МИ» – объектив иммерсионный (масляный) или «ВИ» – вод­ная иммерсия.

Объективы бывают двух систем: ахроматы и апохроматы. Ахроматы устроены проще, но имеют ряд недостатков, которые устранены в более сложных апохроматических объективах.

При применении объективов апохроматов достигается полная яс­ность изображения и устраняется хроматическая аберрация. По­следнее особенно важно при микроскопии цветных объектов. Все объективы (ахроматы и апохроматы) разделяются на сухие и им­мерсионные.

Если между объективом и рассматриваемым препара­том находится воздух, то подобный объектив называется сухим.

Если же объектив погружен в жидкость, заполняющую пространство между его фронтальной линзой и препаратом, то подобный объектив называется погруженным, или иммерсионным (immersio – погружаю). При исследова­нии микробов применяется исключительно иммерсионная, или по­гружная, система объективов.

Иммерсионные объективы имеют преимущество перед сухими. Сравнительный ход световых лучей в сухой и иммерсионной системах представлен на рис. 2. При микроскопии с помощью сухой системы световые лучи, иду­щие от зеркала через конденсор в объектив, проходят через неоднородные среды, различающиеся показателями преломления.

Так, из воздуха (показатель преломления 1,0) пучок световых лучей попадает в стекло (показатель преломления 1,5), затем опять в воздух и, наконец, во фронтальную линзу объектива. При каждом из этих переходов часть лучей, преломляясь на границе разнородных сред, отклоняется в сторону и не попа­дает в объектив.

В результате поле зрения освещается недос­таточно, что особенно важно при пользовании сильными увеличительными систе­мами, где очень малы фронтальные линзы. Чтобы избежать этого, объектив погружают в каплю жидкости (иммерсионное масло, вода), показатель преломления которой близок к пока­зателю преломления стекла. Вторую каплю этой же жидкости на­носят на конденсор.

Таким образом, конденсор, жидкость, пре­парат, жидкость и объектив представляют собой единую сис­тему, не вызывающую отклонения светового луча.

Окуляр (от латинского слова oculus – глаз) состоит из двух плосковыпуклых линз (собираю­щей и глазной). Он увеличивает изображение, получаемое с помощью объектива, в 7, 10 или 15 раз. Такие простые окуляры обычно применяют с ахроматическими объективами.

При работе с апохроматами нужно использовать специальные, так называемые компенсационные, окуляры. В них линзы подобраны таким обра­зом, что они дают хроматическую ошибку, обратную остаточному хроматизму апохромата и потому ее компенсирующую.

Следует иметь в виду, что увеличивает объект только объектив, окуляр же увеличивает не исследуемый предмет, а только его изобра­жение, получаемое в объективе.

Общее увеличение микроскопа равняется произведению увеличения объектива на увеличение окуляра. Так, например, комбинация иммерсионного объектива 90 с окуляром 10 дает увеличение объекта в 900 раз.

Качество микроскопа зависит не только от увеличения ис­следуемого объекта, но и определяется его разрешающей силой. Под последней следует понимать то наименьшее расстояние ме­жду двумя точками препарата, изображения которых можно от­четливо различить под микроскопом. Чем меньше это расстоя­ние, тем больше разрешающая сила.

Разрешающая сила биологического микроскопа с иммерсион­ной системой равна 0,2 мкм. Следовательно, при пользовании та­ким микроскопом пределом видимости являются объекты размером не меньше 0,2 мкм.

Нужно помнить, что иммерсионный объектив требует особого бережного обращения с ним. Опускать этот объектив нужно ос­торожно, чтобы не раздавить стекло препарата, что влечет за собой порчу фронтальной линзы.

Погружать иммерсионный объек­тив в каплю масла на предметном стекле надо под контролем глаза, наблюдая сбоку, причем глаз должен находиться на уровне предметного столика.

После погружения объектива в ка­плю масла, глядя в окуляр, при помощи макрометрического винта осторожно опускают тубус микроскопа, пока не находят в поле зрения контуры препарата. Затем с помощью микро­метрического винта устанавливают точное изображение объекта.

По окончании микроскопирования поднимают тубус микро­скопа, а затем снимают препарат; фронтальную линзу осторожно вытирают мягкой тряпочкой, иногда смачивая ее спиртом, раз­веденным водой 1:1.

Освещение. При работе с конденсором Аббе независимо от источника света нужно поль­зоваться только плоским зеркалом.

Осветительное устройство (или осветительный аппарат Аббе) составляют зеркало, ирис-диафрагма и конденсор. Зер­кало, благодаря тому, что его оправа вмонтирована в специ­альной вилке, может вращаться в двух взаимно перпендикуляр­ных направлениях. Одна из отражающих поверхностей зеркала плоская, другая вогнутая.

Современная ирис-диафрагма, сокращаясь по типу зрачка, позволяет регулировать величину светового пучка, поступаю­щего в конденсор. Это важно потому, что светосила (апертура) конденсора всегда должна быть немного меньше, чем у объек­тива.

Конденсор представляет собой систему линз, вмонтирован­ных в коническую металлическую оправу. Чем больше линз, тем больше светосила конденсора. Для получения отчетливого изо­бражения необходимо, чтобы препарат оказался в фокусе кон­денсора. С этой целью конденсор передвигается в вертикальном направлении в пределах 20 мм.

Ход лучей. Пучок света, отраженный зеркалом, через диа­фрагму попадает в конденсор. Преломившись в его линзах, лучи попадают на препарат в виде конуса, вершина которого обра­щена к препарату. Пройдя сквозь препарат, лучи вновь расхо­дятся в виде конуса и попадают в объектив.

Преломившись в линзах объектива, лучи на выходе из него дают увеличенное, но обратное изображение. Это изображение строится лучами на некотором расстоянии от задней линзы объектива, на уровне диафрагмы окуляра, т. е. в финальной плоскости глазной линзы. Из окуляра лучи проходят в глаз, и на его сетчатке возникает мнимое, увеличенное, обратное изображение.

Таким об­разом, объектив увеличивает рассматриваемый предмет, а оку­ляр увеличивает изображение. Следовательно, способность мик­роскопа к увеличению есть сумма увеличений, обеспечиваемых объективом и окуляром.

Большинство объективов дает наилучшее изображение при длине тубуса 160 мм, а окуляры, как правило, рассчитаны на расстояние 250 мм, что соответствует расстоя­нию нормального невооруженного глаза от читаемого текста.

Общее увеличение микроскопа (V) может быть определено с учетом этих данных по формуле:

,

гдеFоб – фокусное расстояние объектива;

Fок – фокусное расстояние окуляра.

Хорошее освещение достигается при установке света по ме­тоду Келлера.

Для этого устанавливают осветитель на расстоя­нии 30-40 см от микроскопа и, перемещая патрон с лампочкой или весь осветитель, добиваются четкого изображения нити на­кала лампы на закрытой полностью диафрагме конденсора так, чтобы это изображение полностью заполняло отверстие конден­сора. Закрыв диафрагму осветителя, открывают диафрагму кон­денсора и, перемещая конденсор, добиваются резкого изображе­ния диафрагмы осветителя в поле зрения микроскопа. С помощью зеркала изображение отверстия диафрагмы устанавливают в центре поля зрения, а диафрагму осветителя открывают так, чтобы было ос­вещено все видимое поле зрения. Раскрывать больше диафрагму не нужно, так как это не усилит освещенности, а лишь умень­шит контрастность за счет рассеянного света.

Общие правила работы с микроскопом. Современный микроскоп – это оптический прибор, требующий строгого соблюдения ряда правил при работе с ним. Они касаются обращения с прибором и ухода за ним, а также применения правильного освещения, выбора в каждом конкретном случае наилучшего варианта оптической системы (окуляр – объ­ектив – конденсор) и т. п.

Для защиты от пыли микроскоп нужно хранить под чехлом. Время от времени сле­дует проверять чистоту и состояние оптики и протирать ее, но только снаружи.

Для чистки оптики применяют волосяную кисточку или мягкую ткань, смоченные этиловым спиртом, разбавленным водой (1:1), но ни в коем случае не применяют бензин или ксилол во избежание расклеивания линз.

Механические трущиеся части протирают ксилолом или бензи­ном, а затем смазывают маслом.

Темнопольная микроскопия

Движение бактерий и спирохет можно наблюдать в темнопольном, который отличается от обычного светового спосо­бом освещения препарата. В этом случае применяют боковое освещение, в силу чего получается изображение светяще­гося объекта на темном фоне.

Принцип темного поля основан на том, что падающие сбоку световые лучи отклоняются плотными частицами (в частности, микробами) и последние благодаря этому представляются глазу наблюдателя ярко светящимися.

Бо­ковое освещение в микроскопе можно получить, заменив, обычный осветитель специальным конденсором с затемнением в центре. Такой конденсор задерживает все центральные лучи света и пропускает лишь периферические (рис.3).

Вместо специального конден­сора для темного поля можно пользоваться обычным осветите­лем, между двумя линзами которой вставляют кружок черной бу­маги несколько меньшего диаметра, чем линза. Работать надо с сильным источником света (дуговой лампой или обычной лампоч­кой в 200-300 свечей).

Техника исследований заключается в следующем. На предметное стекло наносят каплю материала и осторожно накрывают покровным стеклом, чтобы не было пузырь­ков газа. Затем на поверхность конденсора помещают каплю воды или кедрового масла, и предметное стекло с препаратом кладут на эту каплю.

Препарат рассматривают либо через сильную сухую систему (объектив ´40), либо через иммерсионную систему. В последнем случае на покровное стекло также наносят каплю кедрового масла, а к иммерсии привинчивают маленькую муфточку – диа­фрагму, чтобы сузить диаметр просвета объектива.

При микроскопии этим методом лучи, освещающие объект, не попадают в объектив микроскопа, поле зрения остается темным, а объект на его фоне кажется светящимся (рис. 4). Эффект темного поля создается при помощи специального конденсора (параболоид или кардиоид) или обычного конденсора с прикрытой кружком черной бумаги центральной частью.

Для наблюдения в темном поле свет устанавливают и цен­трируют, как для светлого поля, и, заменив конденсор специ­альным, прибавляют свет до максимума, раскрыв до отказа диа­фрагму и включив реостат осветителя.

Препараты для исследования в темном поле должны быть приготовлены на очень чистых предметных и покровных стеклах определенной толщины: предметные – не более 1,2 мм, покров­ные – 0,17 мм. Готовят препарат по типу «раздавленной» или «висячей» капли (рис. 5).

Между препаратом и конденсором помещают иммерсионное масло (каплю его наносят на верхнюю линзу конденсора). После этого, поднимая и опуская конденсор, добиваются появления в поле зрения светлого пятна, которое с помощью специальных регули­ровочных винтов конденсора выводят в середину поля зрения.

Затем с помощью нужного увеличения переходят к наблюдению.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Источник: https://studopedia.ru/5_160742_temnopolnaya-mikroskopiya.html

Устройство микроскопа и правила работы с ним

Осветительное устройство: состоит из зеркала, ирис-диафрагмы и конденсора. Зеркало служит для

Тема: Устройство микроскопа и правила работы с ним

Материалы и оборудование. Микроскопы: МБР-1, БИОЛАМ, МИКМЕД-1, МБС-1; комплект постоянных микропрепаратов «Анатомия растений».

Микроскоп — это оптический прибор, позволяющий получить обратное изображение изучаемого объекта и рассмотреть мелкие детали его строения, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности глаза.

Разрешающая способность микроскопа дает раздельное изображение двух близких друг другу линий. Невооруженный человеческий глаз имеет разрешающую способность около 1/10 мм или 100 мкм. Лучший световой микроскоп примерно в 500 раз улучшает возможность человеческого глаза, т. е. его разрешающая способность составляет около 0,2 мкм или 200 нм.

Разрешающая способность и увеличение не одно и тоже. Если с помощью светового микроскопа получить фотографии двух линий, расположенных на расстоянии менее 0,2 мкм, то, как бы не увеличивать изображение, линии будут сливаться в одну. Можно получить большое увеличение, но не улучшить его разрешение.

Различают полезное и бесполезное увеличения. Под полезным понимают такое увеличение наблюдаемого объекта, при котором можно выявить новые детали его строения.

Бесполезное — это увеличение, при котором, увеличивая объект в сотни и более раз, нельзя обнаружить новых деталей строения.

Например, если изображение, полученное с помощью микроскопа (полезное!), увеличить еще во много раз, спроецировав его на экран, то новые, более тонкие детали строения при этом не выявятся, а лишь соответственно увеличатся размеры имеющихся структур.

В учебных лабораториях обычно используют световые микроскопы, на которых микропрепараты рассматриваются с использованием естественного или искусственного света.

Наиболее распространены световые биологические микроскопы: БИОЛАМ, МИКМЕД, МБР (микроскоп биологический рабочий), МБИ (микроскоп биологический исследовательский) и МБС (микроскоп биологический стереоскопический). Они дают увеличение в пределах от 56 до 1350 раз.

Стереомикроскоп (МБС) обеспечивает подлинно объемное восприятие микрообъекта и увеличивает от 3,5 до 88 раз.

В микроскопе выделяют две системы: оптическую и механическую (рис. 1). К оптической системе относят объективы, окуляры и осветительное устройство (конденсор с диафрагмой и светофильтром, зеркало или электроосветитель).

Рис. 1. Устройство световых микроскопов:

А — МИКМЕД-1; Б — БИОЛАМ.

1 — окуляр, 2 — тубус, 3 — тубусодержатель, 4 — винт грубой наводки, 5 — микрометренный винт, 6 — подставка, 7 — зеркало, 8 — конденсор, ирисовая диафрагма и светофильтр, 9 — предметный столик, 10 — револьверное устройство, 11 — объектив, 12 — корпус коллекторной линзы, 13 — патрон с лампой, 14 — источник электропитания.

Объектив — одна из важнейших частей микроскопа, поскольку он определяет полезное увеличение объекта. Объектив состоит из металлического цилиндра с вмонтированными в него линзами, число которых может быть различным. Увеличение объектива обозначено на нем цифрами. В учебных целях используют обычно объективы х8 и х40. Качество объектива определяет его разрешающая способность.

Окуляр устроен намного проще объектива. Он состоит из 2-3 линз, вмонтированных в металлический цилиндр. Между линзами расположена постоянная диафрагма, определяющая границы поля зрения.

Нижняя линза фокусирует изображение объекта, построенное объективом в плоскости диафрагмы, а верхняя служит непосредственно для наблюдения. Увеличение окуляров обозначено на них цифрами: х7, х10, х15. Окуляры не выявляют новых деталей строения, и в этом отношении их увеличение бесполезно.

Таким образом, окуляр, подобно лупе, дает прямое, мнимое, увеличенное изображение наблюдаемого объекта, построенное объективом.

Для определения общего увеличения микроскопа следует умножить увеличение объектива на увеличение окуляра.

Осветительное устройство состоит из зеркала или электроосветителя, конденсора с ирисовой диафрагмой и светофильтром, расположенных под предметным столиком. Они предназначены для освещения объекта пучком света.

Зеркало служит для направления света через конденсор и отверстие предметного столика на объект. Оно имеет две поверхности: плоскую и вогнутую. В лабораториях с рассеянным светом используют вогнутое зеркало.

Электроосветитель устанавливается под конденсором в гнездо подставки.

Конденсор состоит из 2-3 линз, вставленных в металлический цилиндр. При подъеме или опускании его с помощью специального винта соответственно конденсируется или рассеивается свет, падающий от зеркала на объект.

Ирисовая диафрагма расположена между зеркалом и конденсором. Она служит для изменения диаметра светового потока, направляемого зеркалом через конденсор на объект, в соответствии с диаметром фронтальной линзы объектива и состоит из тонких металлических пластинок. С помощью рычажка их можно то соединить, полностью закрывая нижнюю линзу конденсора, то развести, увеличивая поток света.

Кольцо с матовым стеклом или светофильтром уменьшает освещенность объекта. Оно расположено под диафрагмой и передвигается в горизонтальной плоскости.

Механическая система микроскопа состоит из подставки, коробки с микрометренным механизмом и микрометренным винтом, тубуса, тубусодержателя, винта грубой наводки, кронштейна конденсора, винта перемещения конденсора, револьвера, предметного столика.

Подставка — это основание микроскопа.

Коробка с микрометренным механизмом, построенном на принципе взаимодействующих шестерен, прикреплена к подставке неподвижно. Микрометренный винт служит для незначительного перемещения тубусодержателя, а, следовательно, и объектива на расстояния, измеряемые микрометрами.

Полный оборот микрометренного винта передвигает тубусодержатель на 100 мкм, а поворот на одно деление опускает или поднимает тубусодержатель на 2 мкм.

Во избежание порчи микрометренного механизма разрешается крутить микрометренный винт в одну сторону не более чем на половину оборота.

Тубус или трубка — цилиндр, в который сверху вставляют окуляры. Тубус подвижно соединен с головкой тубусодержателя, его фиксируют стопорным винтом в определенном положении. Ослабив стопорный винт, тубус можно снять.

Револьвер предназначен для быстрой смены объективов, которые ввинчиваются в его гнезда. Центрированное положение объектива обеспечивает защелка, расположенная внутри револьвера.

Тубусодержатель несет тубус и револьвер.

Винт грубой наводки используют для значительного перемещения тубусодержателя, а, следовательно, и объектива с целью фокусировки объекта при малом увеличении.

Предметный столик предназначен для расположения на нем препарата. В середине столика имеется круглое отверстие, в которое входит фронтальная линза конденсора. На столике имеются две пружинистые клеммы — зажимы, закрепляющие препарат.

Кронштейн конденсора подвижно присоединен к коробке микрометренного механизма. Его можно поднять или опустить при помощи винта, вращающего зубчатое колесо, входящее в пазы рейки с гребенчатой нарезкой.

Правила работы с микроскопом

При работе с микроскопом необходимо соблюдать операции в следующем порядке:

1. Работать с микроскопом следует сидя;

2. Микроскоп осмотреть, вытереть от пыли мягкой салфеткой объективы, окуляр, зеркало или электроосветитель;

3. Микроскоп установить перед собой, немного слева на 2-3 см от края стола. Во время работы его не сдвигать;

4. Открыть полностью диафрагму, поднять конденсор в крайнее верхнее положение;

5. Работу с микроскопом всегда начинать с малого увеличения;

6. Опустить объектив 8 — в рабочее положение, т.е. на расстояние 1 см от предметного стекла;

7. Установить освещение в поле зрения микроскопа, используя электроосветитель или зеркало. Глядя одним глазом в окуляр и пользуясь зеркалом с вогнутой стороной, направить свет от окна в объектив, а затем максимально и равномерно осветить поле зрения. Если микроскоп снабжен осветителем, то подсоединить микроскоп к источнику питания, включить лампу и установить необходимую яркость горения;

8. Положить микропрепарат на предметный столик так, чтобы изучаемый объект находился под объективом. Глядя сбоку, опускать объектив при помощи макровинта до тех пор, пока расстояние между нижней линзой объектива и микропрепаратом не станет 4-5 мм;

9. Смотреть одним глазом в окуляр и вращать винт грубой наводки на себя, плавно поднимая объектив до положения, при котором хорошо будет видно изображение объекта. Нельзя смотреть в окуляр и опускать объектив. Фронтальная линза может раздавить покровное стекло, и на ней появятся царапины;

10. Передвигая препарат рукой, найти нужное место, расположить его в центре поля зрения микроскопа;

11. Если изображение не появилось, то надо повторить все операции пунктов 6, 7, 8, 9;

12. Для изучения объекта при большом увеличении, сначала нужно поставить выбранный участок в центр поля зрения микроскопа при малом увеличении. Затем поменять объектив на 40 х, поворачивая револьвер, так чтобы он занял рабочее положение.

При помощи микрометренного винта добиться хорошего изображения объекта. На коробке микрометренного механизма имеются две риски, а на микрометренном винте — точка, которая должна все время находиться между рисками. Если она выходит за их пределы, ее необходимо возвратить в нормальное положение.

При несоблюдении этого правила, микрометренный винт может перестать действовать;

13. По окончании работы с большим увеличением, установить малое увеличение, поднять объектив, снять с рабочего столика препарат, протереть чистой салфеткой все части микроскопа, накрыть его полиэтиленовым пакетом и поставить в шкаф.

Микроскоп биологический стереоскопический МБС-1 (рис. 2) дает прямое и объемное изображение объекта в проходящем или отраженном свете. Он предназначен для изучения мелких объектов и препарирования их, так как имеет большое рабочее расстояние (расстояние от покровного стекла до фронтальной линзы).

Рис. 2. Устройство микроскопа МБС-1:

1 — окуляр, 2 — винт грубой наводки, 3 — подставка, 4 — зеркало, 5 — предметный столик, 6 — стойка, 7 — оптическая головка, 8 — объектив, 9 — рукоятка переключения увеличения, 10 — бинокулярная насадка, 11 — лампа.

Основная часть микроскопа — оптическая головка. В нижнюю часть ее вмонтирован объектив, состоящий из системы линз, которые можно переключать при помощи рукоятки и этим менять увеличение.

Увеличения объектива обозначены цифрами на рукоятке — х0,6, х1, х2, х4, х7. На корпусе головки имеется точка.

Для установки нужного увеличения объектива надо цифру на рукоятке совместить с точкой на корпусе головки.

На верхнюю часть головки установлена бинокулярная насадка. Окуляры имеют увеличения х6, х8, х12,5. Для установки удобного для глаз расстояния между окулярами надо раздвинуть или сдвинуть тубусы.

К задней стенке корпуса головки прикреплен кронштейн с реечным механизмом передвижения. Подъем и опускание корпуса головки осуществляется вращением винта. Кронштейн надет на стойку, прикрепленную к подставке.

Для работы в проходящем свете, в корпус подставки вмонтирован отражатель света, с зеркальной и матовой поверхностями. С передней стороны корпуса имеется окно для доступа дневного света. Для искусственного освещения предназначена лампа, которую вставляют или в отверстие с задней стороны корпуса (для проходящего света), или в кронштейн, укрепленный на объективе (для отраженного света).

Столик установлен в круглом окне на верхней поверхности корпуса подставки. Он может быть либо стеклянным (при проходящем свете), либо металлическим, с белой и черной поверхностями (при отраженном свете).

Электронный микроскоп (рис. 3) позволяет рассмотреть строение очень мелких структур, невидимых в световом микроскопе, например, тилакоид в хлоропластах.

Его разрешающая способность в 400 раз больше, чем у светового микроскопа. Это достигается за счет потока электронов, вместо видимого света.

Различают два типа электронных микроскопов: трансмиссионный (просвечивающий) и сканирующий (дающий объемное изображение микропрепаратов) (рис. 4).

Рис. 3. Электронный микроскоп.

Рис. 4. Снимки, сделанные на электронных микроскопах:

А — тилакоиды в клетках листа кукурузы (трансмиссионный электронный микроскоп); Б — амилопласты в клетках клубня картофеля (сканирующий микроскоп).

Ход работы

Задание 1. Используя микроскопы, таблицы и практикумы, изучить устройство световых микроскопов (МИКМЕД-1, БИОЛАМ и МБС-1) (рис. 1, 2). Запомнить названия и назначение их частей.

Задание 2. При малом и большом увеличениях микроскопа научиться быстро находить объекты на постоянных микропрепаратах.

Контрольные вопросы

1. Что такое разрешающая способность микроскопа?

2. Как можно определить увеличение рассматриваемого под микроскопом объекта?

3. В чем отличие микроскопов БИОЛАМ и МБС-1?

4. Перечислить главные части микроскопа БИОЛАМ и МИКМЕД-1. В чем их назначение?

5. Назвать правила работы с микроскопом.

Источник: http://e-lib.gasu.ru/eposobia/papina/bolprak/R_1_1.html

Методика выполнения работы

Осветительное устройство: состоит из зеркала, ирис-диафрагмы и конденсора. Зеркало служит для

1. Ознакомление с устройством микроскопа

Поскольку микробиология изучает организмы, большинство из которых невозможно рассмотреть нево­оруженным глазом, для установления их внешней формы, размеров, строения пользуются микроскопом (от греч. micros — малый, scopeo — смотрю). Это оптический прибор, состоящий из механической, осве­тительной и оптической частей (рис. 1).

Рис.1 Микроскоп 1 — основание; 2 — коробка с механиз­мом микрометрической фокусиров­ки; 3 — микрометрический винт; 4 — предметный столик; 5- 6 — винты для перемещения предметного столика; 7 — тубусодержатель; 8 — макрометрический винт; 9 — головка; 10 — тубусс окуляром; 11 — винт для крепления насадки; 12 — револьвер с объективами; 13 — винт, фиксирующий револьвер относительно оси тубуса; 14 — крон­штейн конденсора; 15 — винт пере­мещения конденсора; 16 — конден­сор; 17 — винт для крепления конденсора; 18 — дополнительная линза; 19 — зеркало.

Механическая часть, или штатив микроскопа, состоит из сле­дующих деталей.

Ножка подковообразной или прямоугольной формы, служащая опорой микроскопа.

Тубусодержатель имеет форму дуги и используется в каче­стве ручки при переноске микроскопа.

Тубус — зрительная трубка микроскопа. В верхнее отверстие тубуса свободно вставляется окуляр.

Револьверная насадка крепится к нижней стороне тубуса. Вращая насадку, можно быстро менять ввинченные в нее объек­тивы, во время работы, подводя под тубус любой из них. Объек­тив должен быть, центрирован, т. е.

установлен в рабочее поло­жение, при котором главная оптическая ось линз объектива со­впадает с главной оптической осью линз окуляра. Для этого на верхнем диске насадки против объектива имеется желобок, в ко­торый входит ступица (пружинка), закрепляющая объектив.

При попадании ступицы в желобок ощущается щелчок.

Предметный столик — устройство, на которое помещают изу­чаемый объект. Препарат, закрепляют имеющимися на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат.

Предметный столик может передвигаться в двух взаимно перпен­дикулярных направлениях с помощью двух симметрично распо­ложенных на краях столика винтов. Подвижность столика позво­ляет любую точку препарата расположить под объективом.

Сто­лик может быть также закреплен неподвижно.

Винты — микро и макро. С их по­мощью тубус можно передвигать вверх и вниз для установления его на необходимом расстоянии от препарата.

При вращении винтов по часовой стрелке тубус опускается, при вращении против часовой стрелки — поднимается. Микро­винтом пользуются для ориентировочной грубой установки объектива на «фо­кус», т.е.

на то расстояние от препарата, при котором он де­лается видимым. Для точной настройки объектива служит микровинт.

Осветительная часть мик­роскопа состоит из зеркала, конденсора и ирис-диафрагмы, расположенных под предметным столиком микроскопа.

Зеркало имеет две поверхности: плоскую и вогнутую Оно отражает световые лучи и направляет их к конденсору. Обычно при работе зеркало повернуто к свету плоской стороной.

Конденсор — представляет собой систему сильных линз и служит для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта. Собирая лучи света, отраженные зеркалом, конденсор концентрирует их в плоскости препарата. Конденсор можно передвигать в вертикальном направ­лении при помощи винта.

Ирис-диафрагма, расположенная под конденсором, состоит из тонких металлических пластинок, которые при помощи ры­чажка можно сдвигать или раздвигать, в результате чего отвер­стие диафрагмы может сужаться или расширяться. Ирис-диа­фрагмой регулируют интенсивность освещения препарата. При малом раскрытии диафрагмы возрастают глубина резкости.

Оптическая часть микроскопапредставлена объективами и окуляром.

Объектив состоит из линз, заключенных в металлическую оправу. Линза, обращенная к предмету, называется фронтальной. Объектив обладает определенной увеличительной способностью иопределенной глубиной фокуса. Чем больше кривизна линз, тем короче фокусное расстояние и больше увеличение объектива.

Объектив дает действительное, увеличенное, обратное изображение. На оправе каждого объектива нанесены цифры, показывающие его увеличение. Биологические микроскопы МБР-1, МБИ-1, «Биолам» и другие обычно имеют 3-4 объектива с цифровыми обозначениями 8x,20x,40x,90x, показывающими их собственное увеличение.

Объективы подразделяют на сухие и иммерсионные. При рассматривании препарата с сухим объективом (8x, 20x, 40x) между его фронтальной линзой и препаратом находится воздух. Так как лучи света проходят среды с различными показателями преломления (предметное стекло, вода, покровное стекло, воздух), часть их отклоняется и не попадает в объектив.

При работе с иммерсионным объективом (90x) для устранения светорассеивания расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют кедровым (иммерсионным) маслом, которое подвергают специальной обработке, в результате чего его показатель преломления света становится примерно таким же, как у стекла.

Коэффициент преломления такого кедрового масла равен 1,515, коэффициент преломления стекла — 1,53. Световые лучи при переходе стекла в слой кедрового масла практически не преломляются и, не отражаясь, попадают в объектив. Таким образом достигается наилучшее освещение рассматриваемого объекта.

Кроме того, применение иммерсионного масла повышает разрешающую способность микроскопа.

Окуляр (от лат. oculus — глаз) вставляется в верхний конец тубуса и представляет собой систему двух плосковыпуклых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива. Линза, обращенная к глазу, называется глазной, к препарату — собирательной.

Биологические микроскопы снабжены тремя сменными окулярами. На оправе верхней линзы окуляра указано его собственное увеличение. Обычно окуляр увеличивает изображение, данное объективом в 7, 10, 15 раз.

Для того чтобы определить общее увеличение используемой оптической системы, необходимо увеличение объектива умножить на увеличение окуляра.

Используя биологический микроскоп, можно рассмотреть объект размером не менее 0,2 мкм (микрометр).

Осветитель используют при микроскопировании, применяя часто электрический свет. Для работы применяют специальные осветители ОИ-7, OИ-9 и ОИ -21.

2. Правила пользования микроскопом

Работая с микроскопом, необходимо соблюдать определенные правила обращения с ним.

· Микроскоп вынимают из футляра и переносят к рабочему месту, держа его одной рукой за ручку штатива, а другой, поддерживая за ножку штатива. Наклонять микроскоп в сторону нельзя, так как окуляр может выпасть из тубуса.

· Микроскоп помещают на рабочем столе на расстоянии 3 — 5 см от края стола ручкой к себе.

· Устанавливают правильное освещение поля зре­ния микроскопа. Для этого, смотря в окуляр микро­скопа, зеркалом направляют луч света от настоль­ного осветителя (являющегося источником света) в объектив. Настройка освещения производится с объ­ективом 8х. При правильной установке поле зрения микроскопа будет выглядеть в виде круга, хорошо и равномерно освещенного.

· На предметный столик помещают препарат и закрепляют его клеммами.

· Сначала препарат рассматривают с объективом 8х, затем переходят к большим увеличениям.

Для получения изображения объекта необходимо знать фокусное расстояние (расстояние между объ­ективом и препаратом). При работе с объективом 8х расстояние между препаратом и объективом со­ставляет около 9 мм, с объективом 40х — 0,6 мм и с объ­ективом 90х — около 0,15 мм.

Тубус микроскопа необходимо осторожно опускать вниз с помощью макровинта, наблюдая за объективом сбоку, и приблизить его к препарату (не касаясь его) на расстояние, несколько меньшее фокусного. Затем, глядя в окуляр, тем же винтом, медленно вращая его на себя, поднимают тубус до тех пор, пока в поле зрения не появится изображе­ние изучаемого объекта.

После этого вращением микровинта фокусируют объектив так, чтобы изображение объек­тива стало четким. Микровинт нужно вращать осторожно, но не более чем на пол-оборота в ту или другую сторону.

При работе с иммерсион­ным объективом на препарат предварительно наносят каплю кедрового масла и, глядя сбоку, макровинтом осторожно опускают тубус микроско­па так, чтобы кончик объектива погрузился в каплю масла. Затем, глядя в окуляр, тем же винтом очень медленно поднимают тубус до тех пор, пока не по­явится изображение. Точную фокусировку производят микрометрическим винтом.

· При смене объективов следует вновь отрегулировать интенсивность освещения объекта. Опуская или поднимая конденсор, получают желаемую сте­пень освещенности. Например, при просмотре препа­рата с объективом 8х конденсор опускают, при переходе на объектив 40х – несколько поднимают, а при работе с объективом 90х конденсор поднимают вверх до предела.

· Препарат рассматривают в нескольких местах, передвигая предметный столик боковыми винтами или передвигая стекло с препаратом вручную. При изучении препарата следует все время пользоваться микровинтом, с тем, чтобы рассмотреть препарат во всей его глубине.

· Перед заменой слабого объектива более сильным место препарата, где расположен изучаемый объект, необходимо поставить точно в центр поля зрения и только после этого по­вернуть револьвер с объективом.

· Во время микроскопирования нужно держать оба глаза открытыми и пользоваться ими попеременно.

· После окончания работы следует снять препарат. с предметного столика, опустить конденсор, поставить под тубус объектив 8х, мягкой тканью удалить иммерсионное масло с фронтальной линзы объ­ектива 90х и убрать микроскоп в футляр.

3. Приготовление препаратов

3.1. Приготовление препарата «раздавленная капля»

1 — краситель; 2- окрашенная часть; 3- неокрашенная часть.  

Для приготовления препарата «раздавленная капля» (рис.2) на середину предметного стекла предварительно прокаленной бактериологической петлей наносят каплю из водной суспензии, осторожно накрывают ее и «раздавливают» ее покровным стеклом. Если исследуемый объект «твердый» (например, Mucor), то вначале на предметное стекло помещают каплю воды, а затем в нее помещают объект.

Капля должна тонким слоем заполнить пространство между покровным и предметным стеклами, но не выступать за края покровного стекла.

Излишек выступившей жид­кости удаляют фильтровальной бумагой, если жидкости, мало, ее добавляют. Далее препарат помещают на предметный столик микроскопа и рассматривают с объ­ективом 40х. Окрашивают препарат фуксином или метиленовой синью.

Капля красителя помешается рядом с покровным стеклом, затем метиленовая синь или фуксин попадают под покровное стекло (см. рис 2.)

3.2. Приготовление препарата «висячая капля»

Рис. 3 1 — предметное стекло с лункой; 2 — покровное стекло; 3 — слой вазелина 4 — крышка чашки Петри; 5 — дно чашки Петри; 6 — препарат (капля); 7 — вид сверху. Прим. Чашка Петри используется для хранения препарата.

Посредством этого препарата (рис.3) исследуют микроорганизмы в живом виде, изучая их рост, развитие. Для этого на покровное стекло наносят каплю жидкости с исследуемыми микроорганизмами.

Взять специальное предметное стекло с лункой в центре и смазать ее края вазелином. Лункой предметного стекла накрыть каплю исследуемого материала так, чтобы капля находилась в центре лунки. Предметное стекло слегка прижать и быстро перевернуть его.

При правильном приготовлении препарата капля свисает в лунку.

3.3. Приготовление фиксированного препарата

Рис. 4 1 — предметное стекло; 2 — препарат.

1. Подготовка предметного стекла (обезжирить).

2. Нанесение мазка. Растягиваем либо петлей, либо краем предметного стекла.

3. Высушивание мазка высоко над пламенем спиртовки.

4. Фиксация мазка тепловым способом (над пламенем) 3-4 раза.

5. Окрашивание. Если окрашиваем метиленовой синью, то залить препарат красителем на 4 -5 мин. Если фуксином, то предварительно на препарат поместить фильтровальную бумагу, смоченную водой, а затем нанести краситель на 1 -2 мин. После окрашивания необходимо снять фильтровальную бумагу.

6. Промывание мазка водой.

7. Высушивание мазка.

3.4. Техника окраски по Граму

Заключается она в следующем. На фиксированный мазок наносят 2-3 капли раствора генцианвиолета и через 2-3 мин. окрашивания раствор сливают. На препарат наносят 2-3 капли раствора Люголя и спустя 2-3 мин сливают. Препарат на 30-40 с.

погружают в ста­канчик с 96 %-ным раствором спирта и быстро промывают во­дой. Затем препарат в течение 1-2 мин. докрашивают разведен­ным фуксином, промывают водой и просушивают фильтроваль­ной бумагой.

Грамположителъные бактерии будут фиолетовыми, грамотрицательные — розоватые, так как обесцвеченные спиртом, они воспринимают дополнительную окраску фуксином.

4. Оформление результатов

· Напишите, из каких двух греческих слов (также укажите их перевод) состоит термин «микроскоп».

· Впишите в таблицу части микроскопа, элементы микроскопа и их назначение.

Часть микроскопа Название элемента микроскопа Назначение элемента микроскопа

· Напишите, от какого латинского слова (также укажите его перевод) произошел термин окуляр.

· Рассчитайте общее увеличение микроскопа,еслиприменяли объектив 8х и окуляр 10х.

· Запишите методику приготовления препарата «раздавленная капля».

· Запишите методику приготовления препарата «висячая капля».

· Методика приготовления фиксированного препарата.

· Запишите методику окраски по Граму.

5. Домашнее задание

Подготовиться к защите лабораторной работы №1

Вопросы для контроля

1. Строение микроскопа.

2. Правила пользования микроскопом.

3. Методика приготовления препарата «раздавленная капля».

4. Методика приготовления препарата «висячая капля».

5. Методика приготовления фиксированного препарата.

6. Техника окраски по Граму.

Источник: https://megaobuchalka.ru/1/28791.html

Поскольку микробиология изучает организмы, большинство из которых невозможно рассмотреть невооруженным глазом, для установления их внешней формы, размеров, строения пользуются микроскопом (от греч. micros — малый, scopeo — смотрю). Это оптический прибор, состоящий из механической, осветительной и оптической частей.

Механическая часть, или штатив микроскопа, состоит из следующих деталей.

Ножка подковообразной или прямоугольной формы, служащая опорой микроскопа,

Тубу содержатель имеет форму дуги и используется в качестве ручки при переноске микроскопа.

Тубус — зрительная трубка микроскопа. В верхнее отверстие тубуса свободно вставляется окуляр.

Револьверная насадка крепится к нижней стороне тубуса. Вращая насадку, можно быстро менять ввинченные в нее объективы во время работы, подводя под тубус любой из них. Объектив должен быть центрирован, т. е.

установлен в рабочее положение, при котором главная оптическая ось линз объектива совпадает с главной оптической осью линз окуляра. Для этого на верхнем диске насадки против объектива имеется желобок; в который входит ступица (пружинка), закрепляющая объектив.

При попадании ступицы в желобок ощущается щелчок.

Предметный столик — устройство, на которое помещают изучаемый предмет. Препарат закрепляют имеющимися на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат.

Предметный столик может передвигаться в двух взаимно перпендикулярных направлениях с помощью двух симметрично расположенных на краях столика винтов. Подвижность столика позволяет любую точку препарата расположить под объективом.

Столик может быть также закреплен неподвижно.

Винты — макрометрический и микрометрический. С их помощью тубус можно передвигать вверх и вниз для установления его на необходимом расстоянии от препарата.

При вращении винтов по часовой стрелке тубус опускается, при вращении против часовой стрелки — поднимается. Микрометрическим винтом пользуются для ориентировочной грубой установки объектива на «фокус», т. е.

на то расстояние от препарата, при котором он делается видимым. Для точной настройки объектива служит микрометрический винт.

Осветительная часть микроскопа состоит из зеркала, онденсора и ирис-диафрагмы, расположенных под предметным столиком микроскопа.

Зеркало имеет две поверхности: плоскую и вогнутую. Оно отражает световые лучи и направляет их к конденсору. При естественном освещении и малых увеличениях используют плоское зеркало, при искусственном освещении, так же как и при естественном, но при больших увеличениях — вогнутое.

Конденсор представляет собой систему сильных линз и служит для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта. Собирая лучи света, отраженные зеркалом, конденсор концентрирует их в плоскости препарата.

Конденсор можно передвигать в вертикальном направлении при помощи винта. При опускании конденсора поле зрения микроскопа освещается слабее, при поднятии — ярче.

Обычно при работе с малыми увеличениями конденсор опускают, при работе с большими — поднимают.

Ирис-диафрагма, расположенная под конденсором, состоит из тонких металлических пластинок, которые при помощи рычажка можно сдвигать или раздвигать, в результате чего отверстие диафрагмы может суживаться или расширяться. Ирис-диа­фрагмой регулируют степень освещения и четкость изображения. При малом раскрытии диафрагмы возрастают глубина резкости и четкость изображения…

Оптическая часть микроскопа представлена объективом и окуляром.

Объектив состоит из линз, заключенных в металлическую оправу. Линза, обращенная к предмету, называется фронтальной. Объектив обладает определенной увеличительной способностью и определенной глубиной фокуса.

Чем больше кривизна лийз, тем короче фокусное расстояние и больше увеличение объектива. Объектив дает действительное, увеличенное, обратное изображение предмета.

На оправе каждого объектива нанесены цифры, показывающие его увеличение.

Биологические микроскопы МБР-1, МБИ-1, «Биолам» и другие обычно имеют 3-4 объектива с цифровыми обозначениями 8, 20, 40, 90, показывающими их собственное увеличение.

Объективы подразделяют на сухие и иммерсионные. При рассматривании препарата с сухим объективом (8, 20, 40) между его фронтальной линзой и препаратом находится воздух. Так как лучи света проходят среды с различными показателями преломления (предметное стекло, вода, покровное стекло, воздух), часть их отклоняется и не попадает в объектив.

При работе с иммерсионным объективом (90) для устранения светорассеивания расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют кедровым (иммерсионным) маслом, которое подвергают специальной обработке, в результате чего его показатель преломления света становится примерно таким же, как у стекла.

Коэффициент преломления такого кедрового масла равен 1,515, коэффициент преломления стекла — 1,53. Световые лучи при переходе из стекла в слой кедрового масла практически не преломляются и, не отражаясь, попадают в объектив. Таким образом достигается наилучшее освещение рассматриваемого объекта.

Кроме того, применение иммерсионного масла повышает разрешающую способность микроскопа.

Окуляр (от лат. oculus — глаз) вставляется в верхний конец тубуса и представляет собой систему двух плосковыпуклых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива. Линза, обращенная к глазу, называется глазной, к препарату — собирательной. Биологические микроскопы снабжены тремя сменными окулярами. На оправе верхней линзы окуляра указано его собственное увеличение.

Обычно окуляр увеличивает изображение, данное объективом, в 7, 10, 15 раз. Наиболее четкое изображение предмета получается при сочетании сильных объективов со слабыми и средними окулярами. Для того чтобы определить общее увеличение используемой оптической системы, необходимо увеличение объектива умножить на увеличение окуляра.

Например, применяя объектив 8х и окуляр 10х, получаем общее увеличение микроскопа 80.

Используя биологический микроскоп, можно рассмотреть объект размером не менее 0,2 мкм (микрометр или микрон — 1 мкм равен 1/1000 мм).

Осветитель используют при микроскопировании, применяя часто электрический свет. Для работы применяют специальные осветители ОИ-7, ОИ-19 и ОИ-21.

Источник: https://alternativa-sar.ru/tehnologu/mikrobiologiya/v-n-azarov-osnovy-mikrobiologii-i-sanitarii/1462-rukovodstvo-k-laboratornym-zanyatiyam-mikroskop

Scicenter1
Добавить комментарий